介绍
碳水化合物分离的柱使用不同的色谱分配技术,这些技术基于许多不同的化学特性分离分子。最常见的机制是离子排斥分区色谱法(IEPC)或离子修饰分区色谱法(IMPC)。
该树脂是与键合丙二硫酸基团的聚苯乙烯 - 二烯基苯基聚合物,可以加载阳离子(钠,钙,铅)。带负电荷的磺酸基和积极的电荷金属离子形成一种半透明的膜,可驱除离子物种,但对于中性膜,可渗透。树脂中的洗脱液是第二个(固定)阶段,并且在洗脱液和“树脂 - 亮点”之间的中性部分。通过配体交换效应刺激碳水化合物(见下文)。
“树脂洗脱液”中的可能相互作用是:
- 氢键
- 正常和/或反向相互作用
- 尺寸排除效果
能够分离单,二糖和寡糖的能力: - 配体交换
基于应用程序的列选择
HI-PLEX产品范围包括符合L17,L19,L34和L58的USP分类以及指定方法所需的列尺寸的介质。
下表列出了带有适当列建议的主要应用区域。
应用区域 | 推荐的专栏 |
---|---|
USP方法指定L17媒体 | hi-plex h |
USP方法指定L19媒体 | hi-plex ca |
hi-plex CA(二重奏) | |
USP方法指定L34媒体 | hi-plex pb |
USP方法指定L58媒体 | hi-plex na |
hi-plex na(octo) | |
单,二糖 | hi-plex ca |
hi-plex pb | |
hi-plex h | |
hi-plex na(octo) | |
分离 | hi-plex ca |
有机酸 | hi-plex h |
酒精 | hi-plex ca |
hi-plex k | |
hi-plex h | |
hi-plex pb | |
食物和饮料的掺假 | hi-plex ca |
hi-plex pb | |
食品添加剂 | hi-plex ca |
hi-plex pb | |
乳制品 | hi-plex ca |
hi-plex h | |
甜乳制品 | hi-plex pb |
糖果 | hi-plex ca |
hi-plex pb | |
果汁 | hi-plex ca |
葡萄酒 | hi-plex h |
木浆水解物(纤维素/半纤维素) | hi-plex pb |
发酵监测 | hi-plex h |
寡糖 | hi-plex na |
盐含量高的样品(糖蜜) | hi-plex na(octo) |
寡糖hi-plex CA(二重奏) |
|
玉米糖浆 | hi-plex na |
普通碳水化合物的保留时间
如果有几个选项,则应比较每列的实际样品组件的保留时间,以识别最佳分离的列。出于比较原因,已经添加了氨基丙基柱(极性相互作用)。
化合物 | 保留(分钟) |
||||||
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CA | CA(二人) | k | pb | H | NA(八八) | 氨丙基 | |
300毫米x 7.7毫米 | 300毫米x 7.7毫米 | 300毫米x 7.7毫米 | 300毫米x 7.7毫米 | 300毫米x 7.7毫米 | 300毫米x 7.7毫米 | 250毫米x 4.6毫米 | |
含0.005n硫酸的水 | ACN/h2O 3:1 | ||||||
(0.6 ml/min,85ºC) | (0.4 ml/min,85ºC) | (0.6 ml/min,85ºC) | (0.6 ml/min,70ºC) | (0.6 ml/min,70ºC) | (0.6 ml/min,70ºC) | (1.0 mL/min,环境) | |
腺苷(核糖醇) | 15.2 | 14 | 10.3 | 20.9 | 11.5 | 11 | - |
阿拉伯糖 | 13.7 | 13.7 | 12.7 | 16.7 | 11.4 | 12.4 | 7.5 |
阿拉伯醇 | 17.5 | 15.6 | 10.5 | 30.5 | 11.7 | 11.3 | 7.2 |
珍珠醇 | 19.7 | 16.6 | 10.1 | 45.9 | 11 | 11 | 9 |
赤霉素 | 15.5 | 14.7 | 10.9 | 20.7 | 12.7 | 11.7 | 5.9 |
果糖 | 13.5 | 13.3 | 11.6 | 19.3 | 10.6 | 11.6 | 8.3 |
Fucose | 13.8 | 13.7 | 12.5 | 16.7 | 12.2 | 12.3 | - |
半乳糖 | 12.3 | 12.4 | 11.5 | 15.3 | 10.7 | 11.3 | 10.3 |
葡萄糖 | 11.1 | 11.4 | 10.9 | 13.3 | 9.95 | 10.6 | 9.8 |
甘油 | 16.1 | 15.5 | 11.8 | 19.6 | 14.1 | 12.7 | 不建议 |
乳糖 | 9.68 | 9.77 | 8.6 | 12.1 | 8.5 | 8.58 | 19.5 |
麦芽醇 | 12.7 | 11.4 | 8.19 | 27.1 | 8.78 | 8.66 | 15.5 |
麦芽糖 | 9.34 | 9.59 | 8.54 | 11.7 | 8.4 | 8.5 | 17.4 |
麦芽糖 | 8.46 | 8.76 | 7.55 | 11.1 | 7.7 | 7.61 | 31 |
甘露醇 | 17.4 | 15.1 | 9.96 | 30.7 | 11 | 10.6 | 9.2 |
mannose | 12.6 | 12.7 | 11.9 | 20 | 10.5 | 11.4 | 9.1 |
Melezitose | 8.29 | 8.56 | 7.22 | 9.86 | *8.33 | 7.27 | - |
破碎 | 8.46 | 8.66 | 7.31 | 10.4 | *8.2 | 7.38 | 29.7 |
Rhamnose | 12.7 | 12.7 | 11.2 | 19.8 | 11.6 | 11 | - |
山梨糖醇 | 21.5 | 17.2 | 10.3 | - | 11.1 | 11.2 | 9 |
Stachyose | 7.82 | 8.16 | 6.77 | 9.84 | 7.4 | 6.83 | 67.3 |
蔗糖 | 9.25 | 9.51 | 8.24 | 11 | *9.8 | 8.37 | 14 |
木糖醇 | 20.3 | 17.5 | 10.9 | 42.7 | 11.9 | 11.9 | 7.3 |
木糖 | 12.1 | 12.5 | 11.8 | 14.4 | 10.6 | 11.5 | - |
*表示部分水解 |
零件号
产品 | 交联内容 | 粒度 | 反离子 | 列尺寸 | 零件号 |
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列 | |||||
hi-plex ca | 8% | 8 µm | CA2+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1170-6810 |
hi-plex ca | 8% | 8 µm | CA2+ | 250毫米×4.6毫米 | PL1570-6810 |
hi-plex CA(二重奏) | 8% | 8 µm | CA2+ | 300毫米×6.5毫米 | PL1F70-6850 |
hi-plex ca USP L19 | 8% | 8 µm | CA2+ | 250毫米×4.0毫米 | PL1570-5810 |
hi-plex pb | 8% | 8 µm | pb2+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1170-6820 |
HI-PLEX PB USP L34 | 8% | 8 µm | pb2+ | 100毫米×7.7毫米 | PL1170-2820 |
hi-plex k | 8% | 8 µm | k+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1170-6860 |
hi-plex h | 8% | 8 µm | H+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1170-6830 |
hi-plex h | 8% | 8 µm | H+ | 300毫米×6.5毫米 | PL1F70-6830 |
hi-plex h | 8% | 8 µm | H+ | 220毫米×4.6毫米 | PL12506 |
HI-PLEX H USP L17 | 8% | 8 µm | H+ | 100毫米×7.7毫米 | PL1170-2823 |
hi-plex na | 4% | 10 µm | NA+ | 250毫米×4.6毫米 | PL1571-6140 |
hi-plex na | 4% | 10 µm | NA+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1171-6140 |
hi-plex na(octo) | 8% | 8 µm | NA+ | 300毫米×7.7毫米 | PL1170-6840 |
后卫柱 | |||||
hi-plex ca | 8% | 8 µm | CA2+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1810 |
hi-plex CA(二重奏) | 8% | 8 µm | CA2+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1850 |
hi-plex pb | 8% | 8 µm | pb2+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1820 |
hi-plex k | 8% | 8 µm | k+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1860 |
hi-plex h | 8% | 8 µm | H+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1830 |
hi-plex na | 4% | 10 µm | NA+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1171-1140 |
hi-plex na(octo) | 8% | 8 µm | NA+ | 50毫米×7.7毫米 | PL1170-1840 |
警卫弹药筒 | |||||
hi-plex ca | 8% | 8 µm | CA2+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0810 |
hi-plex CA(二重奏) | 8% | 8 µm | CA2+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0850 |
hi-plex pb | 8% | 8 µm | pb2+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0820 |
hi-plex k | 8% | 8 µm | k+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0860 |
hi-plex h | 8% | 8 µm | H+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0830 |
hi-plex na | 4% | 10 µm | NA+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1671-0140 |
hi-plex na(octo) | 8% | 8 µm | NA+ | 5 mm×3毫米(2) | PL1670-0840 |
经常问的问题
问:如何在4%和8%的交叉链接媒体之间进行选择?
答:差异在于材料的孔径,交联密度越低,孔径越大,因此4%的材料用于寡糖分析,而寡糖 问:如何选择最合适的计数器进行分析? 答:必须基于感兴趣的溶质选择树脂 - 请参阅洗脱表的表格,以识别最有效的列。 问:我可以在Hi-plex列上更改计数器吗? 答:由于高质子材料是微孔的,因此膨胀会随着计数离子而变化 - 因此,如果在预包装的圆柱上交换了反离子,则会发生膨胀或收缩,柱将过于压力或空隙 - 这些材料是称为固定离子交换机。 问:我可以将除水域以外的洗脱液与Hi-plex柱一起使用吗? 答:重要的是要确保不从高质子列中剥离柜台离子,因此切勿使用与媒体上不同的阳离子的洗脱柱,但是,使用高质子na,可以运行在高pH值下,氢氧化钠作为洗脱液和HI-PLEX H可以与酸性脱落一起使用。 问:为了保护我的分析列,我应该使用防护盒还是防护栏? 答:这取决于样品矩阵 - 墨盒的体积小于35 µl。间质体积(记住:间质体积=空柱管的体积 - 包装的体积)是Ca。14 µL,因此容量很低,如果样品中含有高浓度的盐或任何浓度的盐,其具有比相结合的金属离子更强的盐或任何浓度的盐(请参阅反离子)选择性的)。 问:当首先安装在HPLC上时,为什么我必须以较低的流速运行列? 答:由于Hi-plex介质是微孔的,因此列的压力比基于二氧化硅的HPLC列的压力较低,因此安装时,重要的是不要超过最大的操作压力。水是粘性的,在室温下压力很高,但是随着温度的升高,粘度会降低,并且可以增加流速。 问:我应该如何从HPLC仪器中删除Hi-plex列? 答:由于该色谱柱将在高温下运行 - 60°C至95°C,因此必须允许逐渐冷却至室温 - 关闭烤箱,让钢的热量冷却。当柱被退役时,洗脱液的流量应减少到0.2至0.1 ml/min 问:如何存储该列? 答:一旦色谱柱处于室温下,应更换端盖,并将柱存储在4°C或凉爽的实验室中。这些柱应存储在没有叠氮化钠的水中。 问:该列失去了性能 - 可以再生吗? 答:有两个主要原因是柱将失败,最大工作压力已超过,并且已经剥离了柜台离子。如果该列变白,则无法再生,但是如果删除了计数器离子,则应遵循“用户指南”中详细介绍的再生过程。 问:我的样本没有紫外发色团,我应该使用什么检测器? 答:由于Hi-plex分离是等值的,因此可以使用折射率检测器,例如Agilent 356-LC折射率检测器。188bet博金宝官方网站如果需要更多的敏感性,则可以使用ELSD,Agilent 385-LC ELSD或Agilent 380-LC EL188bet博金宝官方网站SD。
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