流动相对于微生物生长而言已经成熟。这篇文章讨论了防止微生物生长干扰色谱法的方法。
选择正确的手机阶段可能是开发强大方法的关键 - 但是良好的流动相卫生习惯同样重要!
流动相是微生物的绝佳繁殖场。这些微生物可能会导致在流动路径的任何点上堵塞,从泵室,毛细血管再到LC柱。与其他堵塞的点相比,其中一些堵塞要更容易更换或清洁。
这是流动阶段静置6个月时的样子:
(照片由我的同事法案提供)
您可能会说使用该流动阶段会很疯狂,但是我有看到人们这样做的同事!撇开开玩笑的是,微生物的生长会在肉眼可见之前就会引起问题,因此我们必须采取措施来防止它,即使对于手机阶段,我们只计划使用几天。
减轻微生物生长的有效方法是包括溶液中的有机溶剂或添加剂,例如叠氮化物。对于反相方法,初始条件已经包含了有机溶剂的某些部分,使流动阶段A 95/5 h2O/ACN可能是一种合理的方法,但是对于100%尺寸排除或离子交换之类的100%水性色谱,添加有机溶剂只是一种选择。叠氮化物具有剧毒,使其成为一个不吸引人的解决方案,一些国家和实验室完全禁止其使用。
应通过0.45或0.2 µm滤波器过滤水相,以去除微生物和其他颗粒物,后所有缓冲盐都已溶解并调整了pH值。(实际上,如有必要,取出搅拌杆和搅拌器/热板。)制冷可以帮助将寿命延长长达几周,但是在室温下,应每隔一天的新鲜阶段,至少每隔一天重新重新设计。作为额外的措施,您可以添加在线过滤器到您的LC系统,要么在泵和自动进样器之间或列之前,要根据您是否也要过滤样品。
直到下一次!
安妮
关键词:Biosolumns,LC,手机阶段,最佳实践