色谱法的开始在1903年被俄罗斯植物学家Tswett是基于液相色谱(LC)。气相色谱法(GC)在1952年的发展。超临界流体相色谱(证监会)于1962年开始使用。
本文的目的是显示的差异,应用程序,和优势之间的三层析技术:LC, GC和证监会。
表1。色谱法的进化。
虽然色谱始于大列的玻璃流动相是液体(LC)第一次重大演变对现代仪器在GC。这是因为所需的石油化工分离和分析挥发性分数如汽油和柴油。1952年分配色谱法,开始被用于过程分析和描述第一个商业GCs建成使用浴室。GC仪器更简单,因为它不需要一个流动相泵,就有一个加压载气,调整列的流。此外,需要一个加热列在一个烤箱,一个浴室和一个色谱图记录系统。
现代信用证在1969年描述,但现代仪器正如今天我们所知道的那样花了很长时间来开发和成为可靠和健壮。1980年代和1990年代之间变得众所周知的成名和高效液相色谱法,高效液相色谱法。
香港证监会在1962年首次被恩斯特Klesper和遭受了与信用证相同的初始问题,缺乏适当的和可靠的仪器。只有从1992年开始商业生产的证监会根据平台的GC毛细管或列。
比较之前的三个GC色谱技术,高效液相色谱和证监会,我们需要了解他们的共同点。虽然还有其他的分离过程,如吸附、离子交换、分离大小,GC,高效液相色谱,证监会分离技术使用几乎相同的分区过程分离的化合物列。分区使用液体固定相,沉积在分离柱和柱内的样品运输时流动相,这种化合物可能会或可能不会溶于液体的固定相。如果这种液体固定相的化学样品,它可以溶解一会儿然后回流动相。这个分区过程流动相、固定相之间发生很多很多次列,溶解在流动相固定相并返回。大的化学相似性复合固定相,它越在这种液体相互作用和交叉列的时间越长。没有化学亲和力的化合物的液体固定相,通过直接与流动相,第一,把列。这是分区分离是如何工作的。
色谱柱的变化用于GC、高效液相色谱和证监会的固定相是沉积在列。
下面的图1,在毛细管柱一般用于GC,固定液相沉积和附加的内墙熔融石英管。
图1所示。GC熔融石英毛细管柱与交联固定相。
列用于LC富含二氧化硅微球和液体固定相表面的浸渍和困在这些微球。这些粒子有许多孔隙流动相通过这个载体的物质粒子和分区过程发生。这些粒子的表面积越大,越大分区列。下面的图2说明了一个拥挤的LC列在a和B两种化合物分离的分区了微球的列。
图2。高效液相色谱柱挤满了微球。
在证监会的列可以使用的石英毛细管GC和打包的信用证,也就是说,它没有特定的证监会列,因为它们位于两层析的GC和LC。
运输使用的流动相分子通过列是什么定义了类型的GC色谱法,将,LC或证监会。
GC总是使用气体作为流动相,气体通常是氢、氮、氦。在这种情况下,流动相不干扰分离,应该只传输气相中的分子。GC应用程序依赖于分子的生存能力,而不是降低气相中的。
LC总是使用液体作为流动相。信用证的应用是为所有的化合物都可以溶于流动相,然后可以通过信用证从理论上进行分析。最液体作为流动相在LC是水,甲醇,乙腈、异丙醇或己烷。一般来说,少量的修饰符被添加到这些液体可以改变流动相的pH值或效率。不像GC,信用证也影响了流动相洗脱和色谱分离。所以,这里我们有两个变量优化分离流动相、固定相。如果使用的流动相溶剂可以溶解分析化合物,化合物会延长比固定相,流动相快速洗提。如果流动相的增溶能力差,复合将分区和延长固定相延迟这种化合物在列。
证监会将气体和液体作为流动相。之间的流动相的物质,这是液相,气相,称为超临界流体。图3显示了相图的二氧化碳(CO2)在不同温度和压力。三相点就是在这个温度和压力气体,液体和固体阶段共存。三相点上面有一条线的气相和液相分离二氧化碳。但高于31°C和74条这条线消失,从这个临界点二氧化碳处于超临界状态。在超临界状态下,二氧化碳密度接近液体,但粘度和扩散系数接近气体。这三个特征是对证监会的吸引力。高密度允许更好的增溶和帮助分区列。粘度和扩散接近气体允许更快的分析和少峰扩大即使列包装。
图3。二氧化碳相图之间的气体、液体和超临界流体。
证监会可以提供定期使用的二氧化碳液体二氧化碳钢瓶导管。甚至可以使用二氧化碳用于充气饮料因为当液化二氧化碳;他的质量很好。
水是一个很好的色谱溶剂,但其临界点在上面的图是374°C和压力为227条。这些条件使它不可能使用水作为流动相在证监会。因为它有最低的临界点,二氧化碳非常容易使用和被惰性等优点,不是有毒的气相,用水稍微混相。二氧化碳的缺点是极性的,我们可以说相当于庚烷的极性。
帮助这个缺乏溶解度在证监会的流动相极性化合物;流动相添加修饰符,甲醇是最常用的例子。流动相中的大量的甲醇添加很低,大约10%的二氧化碳。他们可以用二氧化碳或添加预混例行LC泵就好像它是一个梯度。当然,在LC,其他梯度修饰符和三级系统也用于证监会。
任何包装的图4显示列几何,任何粒子大小和k”,香港证监会总是被比高效液相色谱的优势。
图4。高效液相色谱法和证监会HETP效率。
关于香港证监会仪器,在图5中看到的第一个1992年证监会商业化是安装在一个HP5890熔融石英毛细管柱GC和使用。冷藏液体二氧化碳泵是在右边。那时,我们已经与一个额外的添加修改的选项甲醇液体泵。由火焰离子化检测器是传统GC (FID)。香港证监会,有必要保持温度和压力高于临界水平在整个列。甚至生产开始时毛细管柱的压力,这是必要的,以确保压力保持不变,直到结束的列。维持压力在列,使用毛细管限制器250微米之间的毛细管柱,FID飞机,这是一个毛细管内直径的10到50微米。这个限制器需要加热,因为二氧化碳离开这毛细管扩张和冷却限制器,可以成为堵塞如果没有加热。
图5。第一个商业证监会根据GC。
图6显示了一个现代证监会仪器硬件,使用高效液相色谱法。
高效液相色谱有额外的修饰符的液体泵,自动注入器,混合器使二氧化碳的梯度,柱室和爸爸。右边的高效液相色谱法是液体二氧化碳冷却泵。
爸爸检测细胞必须承受高压力,它不能被传统的细胞。此外,我们还必须保持压力高于临界点沿柱和检测器。保持这个压力,使用一个自动加热阀后的探测器在盒子里二氧化碳泵在哪里。
证监会在下面的图6中,可以作为一个传统的高效液相色谱法或证监会,只需修改软件。阅读更多关于此混合工具,访问链接:https://www.188bet博金宝官方网站agilent.com/en/product/liquid-chromatography/hplc-systems/application-specific-hplc-systems/1260-infinity-ii-sfc-uhplc-hybrid-system
图6。香港证监会现代基于高效液相色谱的硬件。
香港证监会在高效液相色谱法的优点是:
——香港证监会是高效液相色谱的三到五倍
——三分之一到五分之一的压力减少证监会相比,高效液相色谱法
——证监会技术正交于反相高效液相色谱法
——香港证监会有较低的运营成本比高效液相色谱法
——证监会是绿色技术和可以回收二氧化碳。不使用乙腈,并使用更少的修饰符。
证监会关于应用程序,通常说它是首选技术分离手性化合物。此外,证监会有很多应用程序,和我们的想法是GC和LC之间的桥梁。见下文的主要类型的物质可以被香港证监会分析:
——任何化合物溶于甲醇或少极性溶剂必须在证监会洗提
——需要一个强大的有机酸或基地流动相添加剂和或修饰符
——小亲脂性的肽必须洗提
——分析物质量25000可以用二氧化碳分离流动相
现在在下面的图7证监会与高效液相色谱法的应用。
图7。应用对比证监会和高效液相色谱法。
证监会推荐阅读,了解更多关于应用程序和用途,在186页的PDF格式的书叫做“超临界流体色谱底漆”链接:https://www.188bet博金宝官方网站agilent.com/cs/library/primers/public/5991 - 5509 en.pdf
找到更多的信息关于信用证的200页的PDF格式的书叫做“LC手册”。这本书谈到了高效液相色谱法列和方法开发。链接:https://www.188bet博金宝官方网站agilent.com/cs/library/primers/public/lc手册-完成- 2. - pdf
对于GC, GC 60页PDF文件的基础上的链接:https://www.188bet博金宝官方网站agilent.com/cs/library/usermanuals/public/g1176 _034327.pdf——90000