当我们考虑建立色谱实验时,我们可能会考虑一些细节,比如确保我们的玻璃器皿是干净的,使用低结合和/或高回收率的样品瓶进行少量蛋白质样品,降低自动进样器的温度以保护样品,并在软件中反复检查方法设置。我们可能没有想到的一件事是用来准备流动相的移液管!我想过玻璃和塑料溶剂瓶以前,我没有想过吸管或刻度圆筒。
下面的例子是标准混合物的寡核苷酸安捷伦188bet博金宝官方网站科技公司的寡核苷酸柱.该方法的流动相含有三乙胺(TEA),其作为离子配对试剂,使极性低聚物可以保留在反相柱上。这两种色谱图之间的唯一区别是用于将TEA添加到流动相的移液管-在顶部色谱图中使用的是一次性塑料移液管,而在底部色谱图中使用的是玻璃刻度圆筒。显然这个细节很重要!
在流动相中加入少量的离子配对剂会导致样品的保留率降低——这正是我们在TEA中加入塑料时所看到的情况。TEA和塑料之间的相互作用可能导致移液材料的不完全转移。
这个例子是一个很好的提醒,要仔细考虑所有与你的样本和移动阶段有关的东西。
下次再聊,
安妮
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